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    透析的原理和過程
    瀏覽次數:298發布日期:2024-01-09

    一、透析的原理

    透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內,將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋內,而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外,直到袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液",袋(膜)外的溶液稱為“滲出液"或“透析液"。

    透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。

    二、透析的過程

    1)把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應為樣品體積量的100倍。(例如,在1L透析液中透析10ml的樣品)

    2)裁剪適當長度的透析管。預留一段額外長度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間。

    3)把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾3-5mm的位置再夾住。不要折疊透析袋。

    4)由透析管開口端將樣品裝入。調整一下頂部空間的長度,夾緊透析夾。

    5)把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。

    6)透析要根據具體的應用需求。通常情況下,允許過夜透析。在持續透析的過程中,至少要進行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,6-8小時和10-14小時(第二天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后,要至少繼續進行2小時的透析。

    注意:對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換。

    7)透析溫度主要取決于樣品。溫度最高限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達37℃。再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達60℃。

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